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赛默飞SDS-PAGE 凝胶电泳:蛋白质分离的原理、技术体系与应用实践

赛默飞SDS-PAGE 凝胶电泳:蛋白质分离的原理、技术体系与应用实践
2025-07-01 21:41:15 来源:财讯网

SDS-PAGE凝胶电泳(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)是蛋白质研究中分离混合物的核心技术,其原理是通过SDS与蛋白质结合破坏高级结构,使不同蛋白携带均匀负电荷,从而在聚丙烯酰胺凝胶中仅按分子量大小迁移。这种方法消除了电荷差异的干扰,让电泳迁移率完全取决于分子尺寸,成为蛋白纯度分析、分子量测定、Western blot前处理及表达量分析的基础手段。作为生物科学的重要技术,SDS-PAGE凝胶电泳在实际操作中展现出不可替代的作用,需要选择放心的品牌。而赛默飞作为一家在生命科学领域具有深厚底蕴和卓越声誉的厂商企业,其赛默飞的SDS-PAGE凝胶电泳产品有着诸多领先优势。

该技术体系的核心组件包括优化的蛋白预制胶与手灌胶系统,预制胶具备4%-20%梯度的多种浓度选择和灵活孔数,适合宽范围蛋白靶点分析,而手灌胶系统则为个化实验提供自主制备的可能。配套的电泳缓冲液分为SDS-PAGE专用和非变两类,后者可保留蛋白天然构象。蛋白Marker体系涵盖预染、非预染及Western blot显影标准,既能实时监测电泳进程,又能精准校准分子量,适配IEF、SDS-PAGE等多种技术。染色系统从快速考马斯亮蓝到高灵敏度银染一应俱全,例如SYPRO Ruby染料可兼容荧光成像,满足不同实验对检测灵敏度的需求。

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在仪器配置方面,电泳槽系统兼容预制胶与手灌胶,小型设备适合快速实验,中型系统支持多凝胶并行操作,配套电源需提供稳定100-200V电压输出。蛋白转印系统采用低甲醇缓冲液,湿式转印实现高效蛋白转移,半干式转印适合快速操作;Invitrogen iBright凝胶成像系统则通过一键式荧光/化学发光检测简化结果分析流程。

标准操作流程包括根据目标蛋白分子量选择凝胶浓度(如12%胶适用于10-100kDa蛋白),混合试剂灌注成型后,将蛋白样品与Loading Buffer高温变处理,加入凝胶孔进行恒定电压电泳,最后通过合适染料显色并分析条带。实验中需注意使用蛋白酶抑制剂避免样品降解,制胶时确保无气泡且聚合充分,电压控制可采用分段式以防止凝胶发热。

相比非变PAGE等方法,SDS-PAGE凝胶电泳具有重复高、操作简便、成本可控的优势,尤其适合高通量分析。结合No-Stain蛋白标记试剂可实现Western blot蛋白归一化,提升定量准确。作为蛋白质研究的“黄金标准”,该技术通过预制胶标准化、快速转印等优化,持续推动分子生物学实验效率的提升。随着技术的不断发展,赛默飞也在持续创新,未来为蛋白质研究领域带来更多高效、便捷的解决方案,推动该领域取得更大的突破。

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责任编辑:kj005

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