传统NK细胞培养方案，需要固相包被激活抗体，限制了NK 规模化、封闭式生产瓶颈，也不符合药监局细胞生产指南明确推荐的全密闭系统降低污染风险的GMP导向；华辰生物 hyperClone® Free-coat NK Soluble Activator NK免包被活化剂全新上市，可溶性双抗直接投加到原代培养体系，提供了NK细胞主要和共刺激信号，优化用于高效NK细胞活化和扩增适配 Grex、全自动封闭设备，贴合 GMP 合规生产需求！

一、行业公认痛点：固相包被工艺，早已跟不上规范化细胞生产

做NK、CAR-NK 工艺开发的同行，一定都被培养瓶固相包被困住产能：

1、操作繁琐，人工成本爆炸

每一批原代扩增都需要提前孵育培养瓶、弃液、清洗；大批量生产时，数个培养瓶手工包被，耗时耗力，批次间人为差异大，工艺重复性差。

2、无法适配封闭式连续化体系，违背 GMP 导向

药监局细胞生产指南明确推荐全密闭系统降低污染风险。但固相包被只能在开放培养瓶内完成预处理，无法接入封闭管路、全自动生物反应器，全程开放式操作大幅提升微生物污染风险，核查极易出现缺陷项。

3、放大上限极低，量产天花板明显

小试T25、T75 瓶尚可操作；放大至临床级 Grex 大容量培养体系、一次性密闭生物反应器时，固相包被完全无法实现，只能拆分多瓶并行，占用大量洁净区空间，产能难以爬坡。

4、批次活性不均，质控难度高

包被孵育时长、温度、抗体残留都会影响 NK 激活强度，不同瓶之间扩增倍数、细胞杀伤活性波动大，增加放行检测压力。

二、突破性方案：hyperClone® Free-coat NK Soluble Activator可溶性免包被活化剂

华辰生物开发的双特异性可溶性活化抗体，彻底抛弃固相包被步骤，一步解决规模化扩增痛点。

核心产品优势

1、全程液体可溶性，开盖直接投加

无需提前包被培养器皿，复苏种子细胞后，直接将活化剂加入激活培养基，混匀即可启动 NK 激活，省去 2h 以上包被、封闭操作。

2、完美适配全封闭生产设备，符合法规要求

兼容 Grex 底透大容量培养瓶、Sepax 全自动细胞处理系统、密闭生物反应器；全过程无开放式瓶预处理，管路直接添加，完整闭环流程，满足细胞治疗 GMP 密闭生产核查标准。

3、无饲养层、无磁性组分，临床工艺友好

纯蛋白基可溶性双抗体系，不添加滋养细胞、磁珠等外源杂质，降低外源因子引入风险，简化终产品质控检测项目。

4、激活信号充足，NK 扩增倍率优异

同时提供 NK 细胞核心激活信号与共刺激信号，搭配重组 IL-2 等细胞因子即可实现高效扩增，无需额外辅助激活试剂。

三、培养数据

3.1原代细胞试验条件

起始种子：50ml外周血Ficoll分离得原代细胞接种

容器：培养袋

活化剂：hyperClone® Free-coat NK 免包被活化剂（GMP-F011，1mL/体系）

培养基：novaNK-20无血清扩增培养基

流式质控结果

培养第 14 天流式检测：CD3⁻CD56⁺NK 细胞纯度稳定98% 以上，细胞高表达 CD16临床可适配ADCC抗体，脱颗粒能力、体外肿瘤杀伤活性无衰减，完全满足异体 NK 细胞制剂回输标准。

3.2 冻存种子细胞试验条件

起始种子：1×10⁸冻存 NK 种子细胞（kit03培养到8-10天冻存的种子细胞）

设备：Grex 密闭底透培养系统

活化剂：hyperClone® Free-coat NK 免包被活化剂（GMP-F011，1mL/体系）

培养基：novaNK-20无血清扩增培养基

完整培养记录表

配套纯化组合方案

搭配同系列 pureSep™无磁珠 NK 阴性去除试剂：全血一步纯化高纯度 NK，再用 Free-coat 可溶性活化剂封闭式扩增，形成纯化→激活→扩增全套无磁珠、免包被完整工艺，适配从原代血液到成品细胞全链条开发。

四、标准化简易操作流程（封闭式体系通用）

1、种子细胞复苏洗涤，转入密闭 Grex / 生物反应器体系；

2、按体系体积直接添加 Free-coat NK 免包被活化剂（1mL/100mL 初始培养基）；

3、补充含 IL-2 等细胞因子的无血清扩增培养基，密闭静置培养；

4、通过封闭管路补液扩容，全程无需开盖操作；

5、每 2–3 天取样监测密度、活率，可收获高活性功能 NK 细胞。

五、产品储存与规格

产品名称：hyperClone® Free-coat NK Soluble Activator NK免包被活化剂（货号 GMP-F011）

规格：1mL /支

生产企业：苏州华辰生物科技有限公司

技术支持热线：400-965-9800

六、文末福利

1、私信服领取【Grex 封闭式 NK 完整扩增 SOP】+ 流式质控方案；

2、科研院校、细胞 CDMO、药企可免费申请小样实测扩增效果；

3、配套 pureSep NK 纯化试剂 + Free-coat 活化剂成套采购，享批量专属优惠。

工艺升级、规模化量产、GMP 合规需求，欢迎留言交流！

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